新生牛血清是一種旨在用于各種動物細胞、胚胎細胞、組織器官的培養(yǎng)以及細
胞融合和單抗制備等。取自出生24小時之內的新生牛,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
在細胞培養(yǎng)過程中,應該遇到過使用的新生牛血清系列產生沉淀的問題,溶解后有沉淀,往往還怕是染菌,即使不是染菌有些沉淀在細胞瓶內也會影響生長,注意一些小的細節(jié)還是非常有必要的:
一般推薦在-20℃儲存新生牛血清系列,避免反復凍融。
解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產生沉淀物。
解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
新生牛血清系列的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。
溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
實驗提示
1、建議使用10%的新生牛血清用于常見細胞的體外培養(yǎng)
2、建議使用20%的新生牛血清用于人體正常細胞的體外培養(yǎng)
注意事項
1、操作時,避免污染母液
2、操作時,須戴手套
3、避免反復凍融