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應(yīng)用:
用于培養(yǎng)或擴(kuò)增來(lái)自于外周血單個(gè)核細(xì)胞或已純化分離的 T 細(xì)胞中擴(kuò)增培養(yǎng) CIK細(xì)胞。
儲(chǔ)存:2-8℃,避光保存。
使用說(shuō)明:
從外周血擴(kuò)增活化的 CIK細(xì)胞
1.將收集到的PBMC細(xì)胞懸浮于細(xì)胞培養(yǎng)液中(細(xì)胞濃度1.5-2.0×106 cells/ml),加入添加劑A使有效濃度為2000 IU/ml,加入IL-2使有效濃度為1000IU/ml,加入終濃度為100ng/ml的添加劑B,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
2.第3天,取100ul培養(yǎng)液細(xì)胞計(jì)數(shù),加入含1000IU/ml IL-2,2000 IU/ml添加劑A,100ng/ml添加劑B的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液,調(diào)整細(xì)胞濃度為1.5-2.0×106 cells/ml,繼續(xù)培養(yǎng)。
3.第5-6天,取100ul培養(yǎng)液細(xì)胞計(jì)數(shù),加入含1000IU/ml IL-2新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液,調(diào)整細(xì)胞濃度為1.5-2.0×106 cells/ml,繼續(xù)培養(yǎng)。
4.在7~14天,根據(jù)培養(yǎng)基顏色變化(或者2~3天添加一次培養(yǎng)液)和細(xì)胞計(jì)數(shù),基本按照細(xì)胞濃度在1.0×106/ml 以上添加新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液(含1000IU/ml IL-2)。可以根據(jù)需要多培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)袋培養(yǎng),培養(yǎng)基總體積不超過2L。
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